| Resumo: | Como já evidenciado em nossos estudos prévios, a HDAC6 desempenha papel crucial na proliferação, quimiorresistência e motilidade de células de melanoma em monocamada. Este estudo investigou os efeitos funcionais e os mecanismos moleculares associados à sua inibição seletiva pelo WT161, utilizando abordagens in silico, in vitro e in vivo, visando compreender melhor o papel dessa enzima na progressão tumoral e seu potencial como alvo. Na análise in silico, foram utilizados os bancos GSE15605, GSE122910 e GSE44660, com perfis de expressão gênica de melanomas humanos. Realizaram-se análises de expressão, correlação e interação proteína-proteína (PPI) envolvendo a HDAC6. Na abordagem in vitro, esferoides das linhagens CHL-1 e WM1366 foram usados para avaliar proliferação (fosfatase ácida), crescimento em ágar, migração e invasão celular 3D. A interação entre WT161, inibidor de HDAC6, e os quimioterápicos temozolomida (TMZ) e dacarbazina (DTIC) foi analisada pelo método de Chou-Talalay. A imunomarcação nas esferas demonstrou que o WT161 aumentou a população CD24+ e modulou a expressão de miRNAs associados tanto à inibição quanto ao impulso da progressão tumoral. No modelo in vivo, foi utilizado o sistema singênico C57BL/6 com células B16-F10. Avaliou-se a massa tumoral e a toxicidade por análise de eritroblastos, micronúcleos, massa de órgãos e parâmetros bioquímicos (TGO, TGP, ureia, creatinina). A expressão de α-tubulina, β-catenina, E-caderina e vimentina foi analisada por imunohistoquímica. HDAC6 mostrou-se superexpressa em melanomas primários e metastáticos, correlacionando-se com CDKN2A, MKI67, CTNNB1, CHD2 e VIM, principalmente via CTNNB1. WT161 reduziu proliferação, clonogenicidade, migração e invasão celular, além de sinergizar com TMZ. In vivo, reduziu a massa tumoral sem toxicidade e modulou marcadores epitelial-mesenquimais. Nosso estudo reforça a HDAC6 como alvo terapêutico e destaca os efeitos antitumorais do WT161 em melanoma.
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