| Resumo: | Pseudomonas aeruginosa é uma bactéria patogênica Gram-negativa que afeta indivíduos imunossuprimidos com fibrose cística, carcinomas ou queimaduras. Devido à ineficácia dos antibióticos contra cepas multirresistentes, a terapia com fagos tem mostrado resultados promissores em ensaios clínicos contra infecções bacterianas. A otimização do isolamento de fagos com potenciais efeitos protetores em membranas mucosas infectadas possibilita o desenvolvimento de formulações profiláticas, sanitizantes e terapêuticas. Este estudo teve como objetivo desenvolver uma metodologia de triagem in vitro para isolar bacteriófagos líticos contra P. aeruginosa com replicação diferencial na presença de mucina. Dois fagos com atividade distinta na presença de mucina foram utilizados como controles negativo (P. aeruginosa VAC1) e positivo (P. aeruginosa VAC3). A cepa P. aeruginosa PA14 foi incubada com diferentes fagos (MOI: 1) em LB broth suplementado com diferentes concentrações de mucina (0,1%, 0,5%, 1%). As contagens bacterianas (UFC/mL) e virais (PFU/mL) foram determinadas após 24 horas de incubação. Os resultados demonstraram que todos os fagos foram capazes de infectar a cepa PA14, mesmo quando expostos a diferentes concentrações de mucina. Além disso, observou-se que as bactérias sofreram alterações fenotípicas e apresentaram aumento de UFC/mL na presença de mucina. O LB broth enriquecido com 0,1% de mucina não influenciou a replicação dos fagos (VAC1 e VAC3). Entretanto, em LB broth suplementado com 0,5% de mucina, foi observada replicação diferencial do bacteriófago VAC3, com título quatro ordens logarítmicas superior ao das culturas não tratadas. O VAC1 não apresentou alterações significativas em nenhuma concentração de mucina. Essa metodologia pode servir como triagem para fagos líticos com maior capacidade de replicação em ambientes ricos em mucina. No entanto, pesquisas adicionais são necessárias para compreender a influência da ligação à mucina no potencial protetor das superfícies mucosas.
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| Referência 1: | ADNAN, Muhammad et al. Isolation and characterization of bacteriophage to control multidrug-resistant Pseudomonas aeruginosa planktonic cells and biofilm. Biologicals, v. 63, p. 89-96, 2020. |
| Referência 2: | AKREMI, I. et al. Isolation and Characterization of Lytic Pseudomonas aeruginosa Bacteriophages Isolated from Sewage Samples from Tunisia. Viruses, v. 14, n. 11, 1 nov. 2022. |
| Referência 3: | Low HZ, Böhnlein C, Sprotte S, Wagner N, Fiedler G, Kabisch J, Franz CMAP. Fast and Easy Phage-Tagging and Live/Dead Analysis for the Rapid Monitoring of Bacteriophage Infection. Front Microbiol. 2020 |