| Resumo: | A 8-hidroxi-2’-desoxiguanosina (8-OHdG) é reconhecida como um dos principais biomarcadores de estresse oxidativo e dano genético, resultante da oxidação da guanina no DNA. Sua detecção em urina tem se mostrado uma alternativa não invasiva, confiável e clinicamente relevante para avaliação do impacto de agentes tóxicos ambientais e ocupacionais. Entre os grupos mais vulneráveis encontram-se os bombeiros, que, durante o combate a incêndios, são expostos a níveis elevados de hidrocarbonetos policíclicos aromáticos (HPAs), compostos conhecidos pelo potencial mutagênico e carcinogênico. Nesse contexto, o presente estudo teve como objetivo otimizar um método analítico baseado em cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas em tandem (LC-MS/MS) para quantificação de 8-OHdG em amostras de urina. Foram avaliados diferentes parâmetros cromatográficos, incluindo tipo de coluna, fase móvel, vazão e volume de injeção, além de variáveis espectrométricas, como modo de ionização e condições de fragmentação. Os melhores resultados foram obtidos empregando coluna ACE 3 C18-300, 100 x 2.1mm , volume de injeção de 10 µL, fase móvel composta por metanol 90% contendo 0,1% de ácido fórmico, vazão de 0,3 mL/min e tempo de corrida de 3 minutos. As condições espectrométricas estabelecidas foram: ionização por eletrospray em modo positivo, íon precursor 284,3 e íons fragmentos 167,9 e 139,9. Foi feita uma curva analítica tendo a faixa de concentração (0,05 a 20 ng/mL), demonstrando detectabilidade adequada, linearidade e precisão. Os resultados demonstraram a viabilidade do método desenvolvido, com potencial de aplicação em estudos futuros para monitorar os efeitos da exposição ocupacional de bombeiros e contribuir para a avaliação precoce de danos oxidativos ao DNA.
|