AVALIAÇÃO DE COMPOSTOS ADRENÉRGICOS COMO INIBIDORES DA UREASE: ENSAIO BIOLÓGICO IN VITRO E ESPECTROSCOPIA MOLECULAR
Resumo:A urease é determinante nas lesões induzidas por Helicobacter pylori em humanos, viabilizando a sobrevivência dos microrganismos ao neutralizar parte do ácido gástrico. H. pylori pode proliferar em baixo pH no estômago, contribuindo para gastrite, úlceras gástricas e câncer gástrico (KHAN et al., 2024). Identificar fármacos utilizados em humanos com potencial inibição da urease e bom perfil de segurança é de interesse médico. Metoxamina, fenilefrina, fenoterol e metaproterenol são ligados ao sistema adrenérgico, atuam como agonistas ou moduladores de receptores adrenérgicos, usados como vasopressores ou broncodilatadores. O objetivo foi avaliar, in vitro, a inibição da urease purificada de Canavalia ensiformis pelos compostos metoxamina HCl, fenilefrina HCl, fenoterol HBr e metaproterenol hemisulfato, e a interação enzimacompostos por espectroscopia molecular. A atividade da urease foi medida pelo método do indofenol, com 0,5; 1; 3 e 6 μM dos compostos e 12 mU de urease (WEATHERBURN, 1967). A interação enzima-compostos foi avaliada com a enzima a 5 μM e os fármacos a 18 μM. A porcentagem de inibição da atividade ureolítica não variou para todos os compostos em 3 e 6 μM, atingindo 70%. Entretanto houve queda drástica para metaproterenol hemisulfato a 0,5 μM (5%) e 1 μM (8,8%) diferindo estatisticamente dos demais fármacos nas menores concentrações. O aumento das concentrações não modificou a inibição, exceto para metaproterenol hemisulfato, que apresentou melhores resultados a 3 e 6 μM. Na espectroscopia de absorção molecular a urease apresentou pico máximo em 202–204 nm, e os fármacos exibiram picos característicos (fenoterol: 230 e 275 nm; metoxamina: 207, 230 e 290 nm; metaproterenol: 225 e 275 nm; fenilefrina: 216 e 275 nm). Em todos os casos, as curvas dos espectros dos complexos formados com a urease não se sobrepuseram à soma dos espectros individuais, evidenciando interação entre a urease e fármacos. Conclui-se que todos os compostos testados apresentaram atividade inibitória significativa, interagindo com a enzima urease.
Referência 1:KHAN, A. et al. Synthesis of novel 2-mercapto-1,3,4-oxadiazole derivatives as potent urease inhibitors: in vitro and in silico investigations. Journal of Molecular Structure, [S.L.], v. 1312, p. 13859
Referência 2:WEATHERBURN, M. W. Phenol-hypochlorite reaction for determination of ammonia. Analytical Chemistry, [S.L.], v. 39, n. 8, p. 971–974, 1967.